高中生物pcr技術要幾,高中生物PCR技術

時間 2021-08-30 09:29:22

1樓:心語之飛

關於pcr的話 首先是原料

原料包括:

緩衝液(一般含mg2+,促進taqdan聚合酶的工作,因為量太少,表面往往加上甘油防止蒸發)

模板(想要擴增的dn**段)

dntp(4種脫氧核苷酸,一般都會使用連著3個磷酸基團,即結構類似於atp而核糖部分是脫氧核糖的脫氧核苷酸,因為高能磷酸鍵在合成的時候可以斷裂提供能量)

引物(根據模板設計的dna單鏈片段,一般要注意不能互補,有時候會在上面設計酶切位點以便擴增完成後的操作)

taqdna聚合酶(即耐高溫dna聚合酶,最適溫度較高,適合pcr的過程)

過程大致包括:

加熱變性(使模板鏈解旋)

退火(使引物結合至模板單鏈3'端)

延伸(維持一個不是很高的溫度使taq酶從子鏈5'端開始合成)

迴圈上述步驟即可使目的基因片段成幾何倍數擴增

需要注意:

提取含有目的基因片段的dna後,引物設計在目的基因兩端,即使模板遠遠長於目的基因片段,也可以大量擴增出目的基因,具體數值x和擴增次數n的關係為x=2^n-2n(n≥3且為整數)

這裡是高二狗 剛剛學過選三 純手打不容易希望得到採納qwq

2樓:夏天留白

就是培養大腸桿菌時擴增用的,選修一中的內容。

3樓:匿名使用者

高中生物~那就應該是 變性~退火~延伸 迴圈~

高中生物pcr技術

4樓:匿名使用者

在聚合作用的起始時,可以刺激合成另一種大分子,並與反應物以共價鍵形式連線的序列。在核酸化學中,引物是一段短的單鏈rna或dn**段,可結合在核酸鏈上與之互補的區域,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點,核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈。體外人工設計的引物被廣泛用於聚合酶鏈反應、測序和探針合成等。

沒有引物的話,dna聚合酶是沒有辦法延長dna鏈的http://baike.baidu.

com/view/352480.htm?fr=ala0_1_1 這裡有介紹

5樓:匿名使用者

1.兩段dn**段2.用來與dna連線使dna複製開始3.有3端但沒5端

高中生物關於pcr技術的問題 10

6樓:匿名使用者

這張圖還是蠻清楚的。我們想要的是與雙實線一邊長的dn**段(即拋卻兩端虛線部分)進行到第三輪即與題目所給**相符。在第四輪的時候問基因1,本質是問第四輪有多少實線等長dn**段,依據半保留複製,數第三輪純實線dna單鏈數,有8條

7樓:戶捷委靜雅

在耐高溫的dna聚合酶的作用下,從引物後面將脫氧核苷酸一個個加到模板鏈上,形成雙鏈dna。

高中生物pcr技術的問題

8樓:慵懶的熊熊

pcr(聚合酶鏈式反應)

bai是du利用dna在體外攝氏95°高溫時zhi變性會變成單鏈,低溫(dao經常是專60°c左右)時引物與單屬鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度(72°c左右),dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。

引物i和引物ii區域性發生鹼基互補配對這時引物就不能和單鏈結合,導致dna不能合成。

課本中一對鹼基互補不影響後續。

9樓:匿名使用者

pcr技術又叫抄dna體外複製,dna複製時要分別以dan的兩條鏈為模板,pcr擴增時引物與模板鏈結合引導複製。因此當引物之間發生鹼基互補配對後會導致引物不能與模板鏈結合從而使引物失效。選修3課本pcp技術的那個**的一對引物中有一對鹼基互補但還不足以使引物結合在一起。

高中生物pcr技術擴增的是兩引物之間的核苷酸序列是什麼意思

10樓:匿名使用者

首先有一段雙鏈模板dna,根據模板dna兩端的序列設計兩條引物,每條引物與其中一條鏈互補。如下圖所示。

引物1-->

5‘ *********x 3’

3‘ *********x 5’

<--- 引物2

在pcr反應過程中,每條引物結合一條模板dna鏈,從5‘-3’方向開始擴增,所以最後擴增得到的序列就只能是在兩條引物之間的序列。可以找一些原理圖看一下,就比較容易理解了。

11樓:匿名使用者

pcr技術中擴增的是兩引物之間的核苷酸序列,意思是採用該技術,可以大量擴增引物之間的序列,一般情況下,我們需要大量的某一基因的片段時,我們在基因的兩端分別設計引物(一段一條),然後在體外,採用pcr的方法,用引物進行體外dna複製,從而大量合成引物之間的基因。

pcr即聚合酶鏈式反應是一種用於放大擴增特定的dn**段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊dna複製,pcr的最大特點,是能將微量的dna大幅增加。

其原理為:

dna的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在dna聚合酶的參與下,根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現,dna在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。

因此,通過溫度變化控制dna的變性和復性,加入設計引物,dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製。

但是,dna聚合酶在高溫時會失活,因此,每次迴圈都得加入新的dna聚合酶,不僅操作煩瑣,而且**昂貴,制約了pcr技術的應用和發展。

耐熱dna聚合酶--taq酶的發現對於pcr的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個迴圈加酶,使pcr技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,pcr技術得以大量應用,並逐步應用於臨床。

pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。pcr由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板dna的變性:

模板dna經加熱至93℃左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板dna與引物的退火(復性):模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55℃左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:dna模板--引物結合物在72℃、dna聚合酶(如taqdna聚合酶)的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基互補配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留複製鏈,重複迴圈變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留複製鏈”,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。

每完成一個迴圈需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

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