怎樣測定蔬菜中的維生素C,怎麼測定蔬菜或水果中維他命C的含量

時間 2021-08-11 17:34:59

1樓:小周高等教育**答疑

1.滴定法測定維生素c

1.1測定原理

2,6一二氯靛酚法和碘量法是較常見的滴定測定維生素c的方法。還原型抗壞血酸還原染料2,6一二氯靛酚,該染料在酸性中呈紅色,被還原後紅色消失。還原型抗壞血酸還原2,6一二氯靛酚後,本身被氧化成脫氫抗壞血酸。

在沒有雜質干擾時,一定量的樣品提取液還原標準2, 6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素c的量成正比。

碘量法的原理:維生素c包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種,當用碘滴定維生素c時,所滴定的碘被維生素c還原為碘離子,隨著滴定過程中維生素c全被氧化,所滴入的碘將以碘分子形式出現。碘分子可以使含指示劑(澱粉)的溶液產生藍色,即為滴定終點。

1.2測定操作

2,6一二氯靛酚法:取適量的樣品可食部,加入100 ml 2%草酸溶液,製成勻漿。取同一樣品勻漿10g,加入1%草酸溶液20 ml,搖勻,用濾紙過濾,取5ml過濾液於錐形瓶中,用2,6一二氯靛酚鈉鹽溶液滴定(1 ml≈0.

02 mgvitc),以淡紅色存在30 s內不褪色為滴定終點。記錄2,6-二氯酚靛酚鈉鹽溶液的消耗量,根據結果計算出樣品中維生素c含量(mg/100 g)。

碘量法:將果蔬洗淨,用紗布拭乾其外部所附著的水分,若樣品清潔可以不必洗。樣品可以先縱切為4~8等份,分別稱取20g可是用食部分,置於研缽中加入2% hcl 15~10ml,研磨至漿狀,移於 100ml 容量瓶中,用2% hcl 加至刻度線處,混勻,過濾,記錄濾液總體積。

樣品液的測定: 在50ml 燒杯中,用移液管注入10% ki 溶液0.5ml,0.5% 的澱粉溶液 2ml,樣品液 5ml,蒸餾水 2.

5ml,用0.001n kio3 液滴定,要一滴滴加入,並時時搖動燒杯,至微藍色不褪色為終點( 一分鐘不褪為止) 。記錄所用 kio3 液毫升數,計算維生素c含量。

1.3測定方法評價

2,6-二氯酚靛酚滴定法具有簡便、快速、比較準確等優點,適用於許多不同型別樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量,易受其他還原物質的干擾,如果樣品中含有色素類物質,將給滴定終點的觀察造成困難。碘酸鉀滴定法較便宜,使用碘酸鉀滴定法測定蔬菜中維生素c含量較為簡便易行,而2,6一二氯靛酚法相對複雜。

總的來說,滴定法操作簡便、快速,無須特殊儀器,但在測定深色樣品時,準確度和精確度欠佳。

2.熒光法測定維生素c

2.1測定原理

deutsch和weeks曾經報道過一種檢測維生素c的熒光分析法(opda),並被指定為維生素c的經典熒光分析法。在該方法中,維生素c先被活性炭(norit)氧化為脫氫抗壞血酸(dhaa),dhaa再與熒光底物鄰苯二胺(opda)結合生成熒光產物,通過對該熒光產物的檢測實現對維生素c的定量分析。孫振豔等[1]提出了一種新的測定維生素c的熒光分析方法。

基於維生素c被cu2+氧化為dhaa,dhaa進一步與苯甲酸及十六烷基三甲基溴化銨產生熒光協同增敏作用,通過對體系熒光強度的測定進行維生素c的定量分析。

2.2測定操作

熒光分析法(opda)的測定方法:稱取一定量樣品,研磨後用水浸泡,取清液加入適量1%草酸溶液,振搖約3min,加入0.2g已處理好的活性炭再充分振搖約3min後過濾,濾液加於兩個25ml比色管再加入5.

0ml緩衝溶液,,其中一管加入2.0ml硼酸溶液(即空白)搖勻,放置15min後,兩管均加入鄰苯二胺溶液10ml,避光放置30min待測。樣品熒光強度減去空白熒光強度值即為樣品相對熒光強度值。

孫振豔等的熒光分析法:在25 ml比色管中依次加入0. 6 ml cuso4溶液,2.

0 ml十六烷基三甲基溴化銨溶液,2. 0 ml苯甲酸溶液,一定體積的維生素c標準溶液,,5. 0 mlnaoh-鄰苯二甲酸氫鉀緩衝溶液,用蒸餾水定容,搖勻。

在35℃恆溫水浴中加熱30 min,將溶液流水冷卻至室溫,激發波長為308 nm,在發射波長408nm處,測量熒光強度f,以不含維生素c的試劑空白為f0,計算δf=f-f。

2.3測定方法評價

熒光分析法測定維生素c具有操作簡單,精密度高,檢出限低等優點,該法可以應用於水果、蔬菜和藥物中維生素c的檢測,適於推廣。

3.光度分析法測定維生素c

3. 1測定原理

2,4-二硝基苯肼法和鉬藍比色法是常見測定維生素c的一種光度分析法。2,4-二硝基苯肼法的原理是總維生素c包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸,樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸,再與2,4-二硝基苯肼作用生成紅色脎,脎的含量與總抗壞血酸含量成正比,進行比色測定。鉬藍比色法是測定果蔬中還原型維生素c含量的一種常用方法,因偏磷酸和鉬酸銨反應生成的磷鉬酸銨經還原型的維生素c還原後生成亮藍色的絡合物,通過分光比色可以測定樣品中還原型維生素c的含量。

3.2測定操作

2,4-二硝基苯肼法:取適量的樣品可食部,加入100 ml 2%草酸溶液,製成勻漿。取勻漿20 g (含1~2 mg抗壞血酸)置入100 ml容量瓶中,用1%草酸溶液定容,混勻後過濾。

取25 ml過濾液放入有2 g活性炭的25 ml比色管中,振搖1 min,過濾。然後取10 ml此氧化提取液,加入10 ml 2%硫脲溶液,混勻。按照gb12392-90中呈色反應方法,用分光光度計進行比色,根據結果計算出樣品中抗壞血酸含量。

按下式計算樣品中vc的含量:x=c·vm×f×1001000。

x—樣品中總抗壞血酸含量,mg/100g;

c—由標準曲線查得或迴歸方程算得“樣品氧化液”總抗壞血酸的濃度,μg/ml; v—試樣用1%草酸溶液定容的體積,ml; f—樣品氧化處理過程中稀釋倍數; m—試樣質量,g。

鉬藍比色法:準確稱取 100 g 樣品, 加入草酸-edta 溶液, 經搗碎後移入 100 ml 容量瓶,定容,過濾,吸取 2 ml 上清液於 50 ml 容量瓶中,加入 1 ml 的偏磷酸-醋酸溶液,5%的硫酸 2.0 ml,搖勻,加入 4 ml 鉬酸銨,以去離子水定容至 50 ml,20 min 後測定吸光度。

3.3測定方法評價

鉬藍比色法測定果蔬中還原型維生素c含量資料穩定性、準確性較好,是一種快速、準確、靈敏度高的測定方法,而且不受樣液顏色的影響。2,4-二硝基苯肼比色法測定總vitc (還原型和氧化型),特異性較好,但操作複雜,是我國食品中vitc測定的標準方法,此方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。

4.高效液相色譜法

4.1測定原理

高效液相色譜法是近年來發展起來的一種測定維生素 c 含量的方法,測定維生素 c 含量通常採用 c18柱或 c8柱,由於維生素 c 對紫外光有吸收,故檢測器常用紫外檢測器。

4.2測定操作

稱取維生素c標準樣品0.1000 g.轉移至100 ml容量瓶中,用雙蒸水定容,得到1.

0mg·ml-1的維生素c標準溶液。參考nisperos-carriedo等的方法。準確稱取果肉1.

00 g,用5 ml 0.2%偏磷酸冰浴研磨, 10000 g離心15 min,殘渣加入4 ml 0.2%偏磷酸再提取,合併上清液,定容至10 ml,經0.

45μm濾膜過濾後待測。每個樣品重複5次。維生素c在240 nm波長時有最大吸收峰,故以240 nm作為檢測波長。

以0.2%偏磷酸為流動相。分別吸取標準溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8m,l各自定容至10 m,l從中分別吸取10.

0μl進樣分析,以峰面積(mv)為縱座標,標樣濃度(mg·ml-1)為橫座標,繪製標準溶液曲線,計算線性迴歸方程的迴歸係數和截距。將樣品溶液分別進樣10.0μl進行液相色譜分析,測定維生素c的色譜峰面積,代入標準曲線計算出維生素c含量。

4.3測定方法評價

高效液相色譜法具有高效、快速、穩定、結構準確、操作簡便等特點。該法分離時間短,對結構不穩定的維生素c尤為適合,還特別適用於顏色較深的提取液樣品的測定,成為近年來較受歡迎的維生素c測定方法。缺點是所用儀器較為昂貴。

2樓:真與人為善

這個測量恐怕只有專業的人員才可以做到,普通人員是無法在家裡做倒的。如果真的需要資料,可以上網搜尋一下,就可以找的一般蔬菜中含有的vc含量。

怎麼測定蔬菜或水果中維他命c的含量

3樓:

1、證明蔬菜(水果)中維生素c的存在

2、比較不同蔬菜(水果)中維生素c含量的多少

【實驗原理】

本實驗利用維生素c的還原性,使其與氧化性的i2反應:

澱粉溶液遇到碘會變成藍紫色,這是澱粉的特性。維生素c能與藍紫色溶液中的碘發生作用,使溶液變成無色。通過這個原理,可以用來檢驗一些蔬菜中的維生素c。

通過消耗i2的量可以計算維生素c的含量。

【儀器藥品】酸式滴定管,錐形瓶,研缽,碘水,澱粉試液

【實驗步驟】

1、取新鮮蔬菜或水果100克,切碎,磨成糊狀,擠出汁液。

2、取汁液10 ml,加澱粉溶液數滴。

3、用常溫下i2的飽和水溶液進行滴定,至溶液顯藍色。根據不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判斷維生素c含量的多少。

【實驗討論】

1、方法選擇:

此方法簡單,操作易行,現象明顯,適合作為中學實驗。

此實驗有兩種操作方法:①用碘水滴定蔬菜或水果汁液,②用蔬菜或水果汁液滴定碘水。對於汁液較少的蔬菜或水果,選擇方法①較合適;對於方法②終點較易判斷,但需要較多的汁液。

2、維生素c的提取:

對於汁液較少的蔬菜或水果,需要使用提取液,可選用的提取液如下:

①2%草酸②偏磷酸-醋酸溶液

3、脫色劑:

有些蔬菜或水果汁液顏色較深,對滴定終點的判斷有影響,需要脫色可選的脫色劑如下①30%znac溶液和15%k4fe(cn)6②活性炭③白陶土

4、滴定速度:為了避免其他物質的干擾,滴定要迅速,整個過程不要超過2分鐘。

5、其它問題:ph值對此反應有影響,ph值的選擇需進一步**

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