真核細胞亞細胞定位實驗的原理及步驟

1樓：她是我的小太陽

原理：構建編碼目標蛋白和螢光蛋白的融合蛋白的載體，轉染細胞，表達，然後雷射共聚焦顯微鏡觀察螢光訊號所在位置，即可知道該蛋白的亞細胞定位。注意做空載螢光蛋白的對照。

具體步驟：構建目標蛋白與gfp的融合蛋白的瞬時表達載體，基因槍轟擊洋蔥內表皮細胞，或化學（peg）轉化原生質體，瞬時表達後用螢光顯微鏡觀察螢光位置，當然雷射共聚焦**會更漂亮。

2樓：崇光熙

原核細胞（prokaryotic cells），也就是細菌等生物體的簡單細胞，有時被比喻為單間小屋：它們沒有內部膜，所以它們就像乙個單間，沒有牆壁可以分割。如果我們把這個模擬擴充套件到真核細胞，也就是構成植物、真菌和動物的更複雜的細胞，我們會發現，它們在房地產市場上是絕對公升值的。

就像乙個大的家庭住宅被分割成許多不同用途的房間（臥室、浴室、廚房、起居室等），真核細胞也包含了各種不同的具有專門功能的隔間，彼此之間用膜層整齊地分開。這種組織方式讓每個隔室都能保持自己的條件，也就是它開展工作所需要的條件。

例如，被稱為溶酶體（lysosomes）的隔室，作為細胞的**中心，必須保持乙個酸性的ph值，以處理細胞廢物。同樣，被稱為過氧化物酶體（peroxisomes）的結構也會進行被稱為氧化反應的化學反應，並產生過氧化氫，如果不把它們安全地存放在自己的 "房間 "裡，這兩種物質都會損害細胞。

在乙個細胞內保持不同環境的能力，使得真核細胞可以進行複雜的代謝反應，而原核生物則不能。事實上，這也是為什麼真核細胞可以長到比原核細胞大很多倍的重要原因。

原核細胞對比真核細胞

真核細胞的主要特徵是什麼？與原核細胞不同，真核細胞具有：

乙個膜結合的細胞核（nucleu），乙個被膜包圍的**空腔，裡面有細胞的遺傳物質。

一些膜結合的細胞器（organelles），是漂浮在細胞液中的具有特殊功能的細胞室。細胞器的意思是 "小器官"，這個名字反映了細胞器就像我們身體的器官一樣，作為乙個更大系統的一部分，具有獨特的功能。

多條線型染色體（linear chromosomes），而不是原核生物的單條圓形染色體（single circular chromosome）。

真核細胞比原核生物的細胞要複雜得多。它們充滿了一系列迷人的亞細胞結構，在能量平衡、新陳代謝和基因表達方面發揮著重要作用。

3樓：

具體步驟為構建目標蛋白與gfp的融合蛋白的瞬時表達載體，基因槍轟擊洋蔥內表皮細胞，或化學（peg）轉化原生質體，瞬時表達後用螢光顯微鏡觀察螢光位置，當然雷射共聚焦**會更漂亮。