蛋白酶K可以用來消化那些蛋白,蛋白酶K跟蛋白酶有什麼區別?它是幹什麼用的?

時間 2021-09-13 15:43:43

1樓:匿名使用者

proteinase k,中文名為蛋白酶k。不含dnase,不含rnase,進口分裝,可直接使用。可以用於消化各種蛋白。

用於各種常見的分子生物學、細胞生物學等相關實驗,例如基因組dna抽提、酶的消化去除等。

酶活力,>30u/mg。在37℃,以血紅蛋白為底物,1分鐘內可以產生相當於1微摩爾酪氨酸folin陽性的氨基酸或多肽的蛋白酶k的量,定義為乙個單位蛋白酶k酶活力。

在很寬的ph範圍內有效,有效的ph範圍為ph4.0-12.5,最佳ph範圍為ph7.5-8.0。

蛋白酶k的最佳反應溫度為65℃,但在65℃或更高的溫度蛋白酶k自身的也非常迅速地降解。很多時候反應溫度選擇50-55℃。

在0.2-1%sds或約10mm尿素存在的情況下,蛋白酶k顯示更高的酶活性。蛋白酶k的常用工作濃度為0.

05-1mg/ml,根據所用緩衝液是否含有sds、尿素、ph是否適合、溫度是否適合等因素確定具體的工作濃度。

2樓:a空氣的味道

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3樓:匿名使用者

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蛋白酶k跟蛋白酶有什麼區別?它是幹什麼用的?

4樓:樂洋姐姐

蛋白酶k廣泛應用於分子生物學,藥理學等科研方面。一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。一般儲存在-20°c,避光防潮密閉乾燥

蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質的酶類的統稱,而蛋白酶k則是特指一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用於生物樣品中蛋白質的降解,比如在提取dna時溶解dna的水中就有一定量的蛋白酶k。所以它們不屬於同乙個產品

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5樓:匿名使用者

蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質的酶類的統稱,而蛋白酶k則是特指一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用於生物樣品中蛋白質的降解,比如在提取dna時溶解dna的水中就有一定量的蛋白酶k。

蛋白酶k的簡介

6樓:匿名使用者

從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到。據資料顯示:該酶有兩個ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理並無直接關係。

然而,如果從該酶中除去ca2+,由於出現遠端的結構變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩餘活性通常已足以降解在一般情況下汙染酸製品的蛋白質。所以,蛋白酶k消化過程中通常加入edta(以抑制依賴於mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的緩衝液。

在消化完畢後、純化核酸前要加入egta(ph8.0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合ca2+。

蛋白酶k,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了rna酶和dna酶活性。

由於蛋白酶k在尿素和sds中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括製備脈衝電泳的染色體dna,蛋白質印跡以及去除dna和rna製備中的核酸酶。蛋白酶k的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的ph範圍內(ph 4-12.

5)均有活性。

推薦反應緩衝液:50mmtris-hcl(ph7.5),10mm cacl2 。

蛋白酶k配製標準:20mg/ml蛋白酶k配製標準(proteinase k):將200mg的蛋白酶k加入到9.

5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶k完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然後分裝成小份貯存於-20℃。

蛋白酶k的作用

7樓:只如初見丶

值得注意的是,蛋白酶k在原位雜交技術中通常用於雜交前的處理,它具有消化包圍靶dna蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交訊號.但蛋白酶k的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果.edta緩衝液可以替代蛋白酶k的作用,解決上述出現的問題,並能達到理想的染色效果.

請問 蛋白酶中k代表什麼?

8樓:匿名使用者

蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用於生物樣品中蛋白質的一般降解。

蛋白酶k具有消化包圍靶dna蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交訊號.但蛋白酶k的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果.

儲存:儲存在-20℃冰箱裡,避免反覆凍融,有效保證12月。

蛋白酶k已廣泛應用在皮革、毛皮、絲綢、醫藥、食品、釀造等方面。

蛋白酶k有什麼特性?

9樓:北京理工大學出版社

蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,從林伯氏白色念球菌中純化得到。該酶有兩個ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理並無直接關係。然而,如果從該酶中除去ca2+,由於出現遠端的結構變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩餘活性通常已足以降解在一般情況下汙染酶製品的蛋白質。

所以,蛋白酶k消化過程中通常加入edta(以抑制依賴於mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/lca2+而不含edta的緩衝液。在消化完畢後、純化核酸前要加入egt(ph8.

0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合ca2+。

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