配製異養微生物的培養基時,是否要專門加入作為能源的物質?為什

時間 2021-09-08 18:54:05

1樓:匿名使用者

總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養基含有碳源、氮源、無機鹽、生長因子、水及能源,但由於微生物營養型別複雜,不同微生物對營養物質的需求是不一樣的,因此首先要根據不同微生物的營養需求配製針對性強的培養基。自養型微生物能從簡單的無機物合成自身需要的糖、脂類、蛋白質、核酸、維生素等複雜的有機物,因此培養自養型微生物的培養基完全可以(或應該)由簡單的無機物組成。例如,培養化能自養型的氧化硫硫桿菌 的培養基組成見。

在該培養基配製過程中並未專門加入其他碳源物質,而是依靠空氣中和溶於水中的co2為氧化硫硫桿菌提供碳源。 培養其他化能自養型微生物與上述培養基成分基本類似,只是能源物質有所改變。對光能自養型微生物而言,除需要各類營養物質外,還需光照提供能源。

培養異養型微生物需要在培養基中新增有機物,而且不同型別異養型微生物的營養要求差別很大,因此其培養基組成也相差很遠。例如,培養大腸桿菌的培養基組成比較簡單,而有些異養型微生物的培養基的成份非常複雜,如腸膜明串珠菌需要生長因子,若配製培養它的合成培養基時,需要在培養基中新增的生長因子多達33種,因此通常採用天然有機物來為它提供生長所需的生長因子。 就微生物主要型別而言,有細菌、放線菌、酵母菌、黴菌、原生動物、藻類及病毒之分,培養它們所需的培養基各不相同。

在實驗室中常用牛肉膏蛋白腖培養基(或簡稱普通肉湯培養基)培養細菌,用高氏1號合成培養基培養放線菌,培養酵母菌一般用麥芽汁培養基,它是將麥芽粉與4倍水混勻,在58~65℃條件下保溫3~4小時至完全糖化,調整糖液濃度為10о巴林, 煮沸後用紗布過濾,調ph為6.0配製而成。麥芽粉組成複雜,能為酵母菌提供足夠的營養物質;培養黴菌則一般用查氏合成培養基。

原生動物也可用培養基培養,有的原生動物需要較多的營養物質,例如梨型四膜蟲(tetrahymena pyriformis)的培養基含有10種氨基酸、7種維生素、鳥嘌呤、尿嘧啶及一些無機鹽等,而有些變形蟲可在較簡單的蛋白腖肉湯(peptone broth)中生長。大多數藻類可以利用光能,只需要co2、水和一些無機鹽就可生長,而某些藻類如眼蟲藻(euglena)中的一些種可在黑暗條件下利用有機物質生長。有些藻類需要在培養基中補加土壤浸液,培養海洋藻類時可直接利用海水,但如果在特殊情況下需要用合成培養基培養海洋藻類時,則必需在培養基中加入海水中含有的各種鹽。

2. 營養物質濃度及配比合適 培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度醣類物質、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑制或殺菌作用。另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(c/n)的影響較大。

嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的摩爾數比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中,培養基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。再如,在抗生素發酵生產過程中,可以通過控制培養基中速效氮(或碳)源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與抗生素的合成。

3. 控制ph條件 培養基的ph必須控制在一定的範圍內,以滿足不同型別微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的最適ph條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適於在ph7~7.

5範圍內生長,酵母菌和黴菌通常在ph4.5~6範圍內生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由於營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累,會導致培養基ph發生變化,若不對培養基ph條件進行控制,往往導致微生物生長速度或(和)代謝產物產量降低。

因此,為了維持培養基ph的相對恆定,通常在培養基中加入ph緩衝劑,常用的緩衝劑是一氫和二氫磷酸鹽(如k2hpo4和kh2po4)組成的混合物。k2hpo4溶液呈鹼性, kh2po4溶液呈酸性,兩種物質的等克分子混合溶液的ph值為6.8。

當培養基中酸性物質積累導致h 濃度增加時, h 與弱鹼性鹽結合形成弱酸性化合物,培養基ph不會過度降低;如果培養基中oh-濃度增加, oh-則與弱酸性鹽結合形成弱鹼性化合物,培養基ph也不會過度公升高。

2樓:匿名使用者

需要,異養型生物無法自己產生有機物來維持自己的正常生命活動。

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