分離mRNA過程中,如果RNA有DNA汙染會有影響嗎

時間 2021-08-11 17:57:05

1樓:匿名使用者

會有影響。因為提取的rna有dna汙染,那麼反轉錄以後的cdna也就有基因組dna汙染,這樣,擴增cdna。都會出現雜帶或非特異性擴增,對實驗結果不好。

由乙個dna分子,邊解旋,邊轉錄。利用細胞核內部的游離核醣核苷酸合成。合成規則遵循鹼基互補配對原則。以上過程叫做轉錄,在細胞核中完成。

接著,mrna穿過核孔。和細胞質中的核醣體結合。選擇trna運輸氨基酸,和對應的三個鹼基排列好。再與其它的氨基酸通過肽鍵連線在一起,形成肽鏈。

rna分子有三大類:信使rna(mrna),核醣體 rna(rrna)。

信使rna的功能:把dna模板鏈上的鹼基序列轉錄為rna分子上的鹼基序列(mrna),再從mrna上的鹼基序列通過合成蛋白質的機構獲得氨基酸序列。

核醣體rna功能:把翻譯系統中各種組分聚集在一起,形成正確的空間排布及高階結構,以完成將遺傳資訊從mrna到多肽鏈的轉變。

2樓:北京索萊寶科技****

有的.你提取的rna有dna汙染,那麼反轉錄以後的cdna也就有基因組dna汙染,這樣,你擴增cdna或者做qpcr,都會出現雜帶或非特異性擴增,對實驗結果不好.

所以一般吸取rna上清液的時候,寧可浪費點rna也不要混雜有下層的dna.

3樓:***

這要看你的實驗要求。一般都會去除dna汙染。

我們都是用promega的rq1(無rnase 活性的dna 酶)處理。

4樓:生物行業那些事

如果rna中有dna汙染一定會對實驗有一定的影響的。

1. 如果你擴增的基因有內含子,那麼跨內含子設計引物可能不會有非特異擴增。但是如果dna殘留多的話會對pcr酶產生影響,擴增效率有收到抑制。

2. 如果你的基因沒有內含子,那麼有dna擴增就會增強擴增訊號(real-time訊號會虛高,普通rt-pcr條帶會比實際的亮),干擾到最終的分析結果。

3. 如果你的基因本身有內含子,而你沒有特別設計引物,dna殘留稍微多一點那麼你有可能會在real-time結果分析中看到溶解曲線有雜峰,或者在rt-pcr中出現非特異帶。

建議你使用dnasei處理步驟的試劑盒提取rna,比如rnaprep系列(tiangen)的試劑盒或者使用tiangen的去基因組rt試劑盒fastquant rt kit(with gdnase),去基因組和rt總共只需要十幾分鐘。即使有非常嚴重的dna汙染都能去除的很乾淨,不會影響實驗,而且**和普通的rt試劑盒幾乎一樣很划算也很方便,你可以試試。

dna有rna汙染影響rt-pcr實驗麼

5樓:匿名使用者

首先,bairna不能用於pcr擴增的du

模板,因此有rna汙染zhi的dna不會影響擴增dao;其次,rt-pcr指的是從版rna反轉錄成權dna再進行擴增的過程,因此,不存在rna汙染dna的說法,只有後者汙染前者的說法。

怎麼判斷提取的rna有沒有基因組dna汙染

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