mirna的螢光定量pcr可以用actin做內參嗎

時間 2021-05-06 00:04:23

1樓:匿名使用者

mirna的螢光定量pcr可以用actin做內參mirna通過與轉錄本的相互作用,關閉或抑制基因的表達。

最近的研究表明它們影響了約三成的基因。

mirna在多個組織中差異表達,這就讓表達圖譜分析成為研究的重點。

同時,mirna的過表達和抑制也是近年來常用的研究方法。

我知道和使用過的u6內參基因只有兩個:rnu6-1和rnu6-2.前乙個就是常見的u6,後乙個有時被稱為u6b.

在我的大鼠rna樣本當中,u6表達量有些太高,u6b的cq值與我的目標mirna比較接近,穩定性也很好.但是這些對植物樣本中的內參基因選擇沒有什麼指導意義.

為了確定u6在植物中的保守性,比較快捷的辦法是找到談論這個話題的文獻綜述.如果沒有人寫過這樣的綜述的話,就只能靠自己去資料庫找到所有序列自己對比了.

關於內參基因的選擇,必須實驗確定特定樣本中的表達水平穩定,其他文獻中報導的內參基因不一定適合你的樣本.做新的課題時,選擇內參基因一般是選取3-5個常用的,pcr測試後選取.

最近在做microrna的螢光定量pcr,用u6做內參,想請教一下,u6的ct值在什麼範圍內,目的基因表達呈線性關係 5

2樓:匿名使用者

我最近也要做mi rna的螢光定量pcr,用u6做內參

,但是苦於沒有找到u6的基因序列(ncbi裡面有好多種,版不曉得哪乙個是),寶生物

權那邊以前有現成的u6引物,但現在不生產了,說只能自己提供基因序列,他們設計和合成,哎!想問一下樓主你的u6引物在哪個公司設計和合成的呀?需要提供基因序列麼?

是人的還是小鼠或其他物種的u6?如果方便的話,可否提供一下小鼠的u6基因序列呢?多謝!

3樓:匿名使用者

你做一下標準曲線不就知道了,2小時的事情

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