生物樣品中蛋白質的處理方法有哪些

時間 2023-03-08 11:45:06

1樓:微生錦文蒯悅

一。蛋白質沉澱方法。

1.中性鹽鹽析法。

⑴在一定的。

ph值及溫度條件下,改變鹽的濃度(即離子強度)達到沉澱的目的,稱為「ks」分級鹽析法。

(ks鹽析:固定ph,溫度,改變鹽濃度)

⑵在一定的離子強度下,改變溶液的ph值及溫度,達到沉澱的目的,稱為「β」分級鹽析法。

(β鹽析:固定離子強度,改變ph及溫度。)

2.等電點沉澱法。

蛋白質等電點沉澱法是基於不同蛋白質離子具有不同等電點這一特性,依次改變溶液ph值的辦法,將雜蛋白沉澱除去,最後獲得目標產物。

3.有機溶劑沉澱法。

許多能與水互溶的有機溶劑如乙醇、丙酮、甲醇和乙腈,常用於低鹽濃度下沉澱蛋白質。

4.非離子型聚合物沉澱法。

20世紀60年代非離子型聚合物開始用於分離血纖維蛋白原和免疫球蛋白,從此高相對分子質量非離子聚合物沉澱蛋白質的方法被廣泛使用,如:聚乙二醇(peg)、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、葡聚醣等。

5.金屬沉澱法。

能與羧基、胺基等含氮化合物以及含氮雜環化合物強烈結合的金屬離子,如:mn2+、fe2+、co2+、ni2+、cu2+、zn2+、cd2+;

能與羧酸結合而不與含氮化合物結合的金屬離子,如:ca2+、ba2+、mg2+、pb2+;

與巰基化合物強烈結合的金屬離子,如:hg2+、ag+、pb2+。

實際使用時,金屬離子的濃度常為。

mol/l。

6.親和沉澱。

初始階段:將乙個目標蛋白質與鍵合在可溶性載體上的親和配體絡合成沉澱;

所得沉澱物用一生中適當的緩衝溶液進行洗滌,洗去可能存在的雜質;

用一種適當的試劑將目標蛋白質從配體中離解出來。

7.選擇性變性沉澱法。

(1)例如對於α-澱粉酶等熱穩定性好的酶,可以通過加熱進行熱處理,使大多數雜蛋白受熱變性沉澱而被除去。

(2)根據欲分離物質所含雜質的特性,通過改變ph值或加進某些金屬離子等使雜蛋白變性沉澱而被除去。

8.反膠束萃取蛋白質。

菌體細胞提取。

固液分離是生物產品生產中的重要單元操作。培養基、發酵液、某些中間產品和半成品等都需進行固液分離。發酵液由於種類多、粘度大及成分複雜,其固液分離最為困難。

固液分離的方法很多,生物工業中常規的方法有分離篩、重力沉降、浮選分離、離心分離和過濾等,其中用於發酵液固液分離的方法主要是離心分離和過濾。

二。超濾膜濾去。

2樓:淘歌

能把問題描述的更具體點麼?處理,是要去掉活性,還是要保護活性,或者是完全清除?

體內藥物分析中為何要處理理生物樣品中的蛋白質?又該如何處理生物樣品中的蛋白質

蛋白質組學樣品前處理的方法

3樓:匿名使用者

溶劑提取法。

同一溶劑中,不同物質具有不同的溶解度。利用混合物中各物質溶解度的不同將混合物組分完全或部分分離的過程稱為萃取,也稱提取。常用方法有以下幾種。

(一)浸提法。

浸提法又稱浸泡法。用於從固體混合物或有機體中提取某種物質,所採用的提取劑,應既能大量溶解被提取的物質,又要不破壞被提取物質的性質。為了提高物質在溶劑中的溶解度,往往在浸提時加熱。

如用索氏抽提法提取脂肪。提取劑是此類方法中重要因素,可以用單一溶劑,也可以用混合溶劑。

(二)溶劑萃取法。

溶劑萃取法用於從溶液中提取某一組分,利用該組分在兩種互不相溶的試劑中分配係數的不同,使其從一種溶液中轉移至另一種溶劑中,從而與其他組分分離,達到分離和富集的目的。通常可用分液漏斗多次提取達到目的。若被轉移的成分是有色化合物,可用有機相直接進行比色測定,即萃取比色法。

萃取比色法具有較高的靈敏度和選擇性。如雙硫腙法測定食品中的鉛含量。此法裝置簡單、操作迅速、分離效果好,但是成批試樣分析時工作量大。

同時,萃取溶劑常易揮發,易燒.且有毒性,操作時應加以注意。

鹽析法向溶液中加入某種無機鹽,使溶質在原溶劑中的溶解度大大降低,而從溶液中沉澱析出,這種方法叫做鹽析。如在蛋白質溶液中加入大量的鹽類(硫酸銨),特別是加入重金屬鹽,使蛋白質從溶液中沉澱出來。

在進行鹽析工作時,應注意溶液中所加入的物質的選擇。它應是不會破壞溶液中所要析出的物質,否則達不到鹽析提取的目的。

化學分離法。

(一)磺化法和皂化法。

這是處理油脂或脂肪樣品時經常使用的方法。例如,殘留農藥分析和脂溶性維生素測定中,油脂被濃硫酸磺化,或被鹼皂化,由疏水性變成親水性,使油脂中需檢測的非極性物質能較容易地被非極性或弱極性溶劑提取出來。

(二)沉澱分離法。

沉澱分離法是利用沉澱反應進行分離的方法。在試樣中加入適當的沉澱劑,使被測組分沉澱下來,或將干擾組分沉澱除去,從而達到分離的目的。

(三)掩蔽法。

利用掩蔽劑與樣液中的干擾成分作用,使干擾成分轉變為不干擾測定的狀態,即被掩蔽起來。運用這種方法,可以不經過分離干擾成分的操作而消除其干擾作用,簡化分析步驟,因而在食品分析中應用十分廣泛,常用於金屬元素的測定。

敘述生物樣品中蛋白質含量測定方法有哪些

蛋白質含量測定方法有 凱氏定氮法,雙縮脲 biuret 法,酚試劑法 lowry 法,考馬斯亮藍 bradford 法,紫外吸收法,bca法及杜馬斯燃燒法。其中bca法與bradford法成為當今實驗室最為常用的兩種蛋白濃度定量檢測方法。bca法常用現成的試劑盒來做,操作簡單又穩定。以下是厚百上bc...

蛋白質與細胞的問題,蛋白質是構成細胞和生物體的重要組成物質,是生命活動的體現者,下列與蛋白質有關的問題敘述錯誤的是(

高二必修一 有關蛋白質和細胞膜那部分 說的很明確 蛋白質的功能有 1.構成細胞和生物體 構成 結構蛋白 2.催化作用 大多數酶是蛋白質 還有少數是rna 3.運輸作用 血紅蛋白能運輸氧氣 它作為載體蛋白 4.調節作用 很多激素屬於蛋白質 像胰島素 也有一些不是 比如性激素是固醇 5.免疫動能 抗體 ...

關於蛋白質的生物題,高一生物關於蛋白質的一題。

一般這種題給分子式的是先看n的。有多少個n就代表最多有多少個氨基酸。因為乙個氨基酸不看r基團,都必須含乙個氨基。這個分子式可以說最多是有17個氨基酸的。最多有17個氨基酸,肽鍵數就是最多16個啦。你說的問題,是這對鏈式的多肽而言的喔,別忘了還有環狀的。總之是很複雜的。環狀的話,就不是你這樣說啦。希望...