1樓：淵源
1)、準備凍存管、凍存盒放置需液氮中儲存的樣品。
2)、液氮中有三個取液氮容器，不宜直接將凍存管放於液氮罐中，這樣會使 凍存管漂浮起來。固可用紗布、棉線將取氮容器口封住，儲存樣品。
3)、採樣品時，需要使用研缽。研缽在使用前，需清洗，並用純酒精灼燒以 充分滅菌。在研磨液氮儲存的樣品時，需加入液氮，迅速研磨，待組織變軟， 再加少量液氮，再研磨。
如此三次。可用消毒過的鑰匙將研缽中的組織樣品轉入 ep 管中。介於所取的樣品不能完全轉移到 ep 管中，故而在取樣時需多採樣品， 以免不夠。
4)、新買的液氮罐需用一定液氮進行清洗與預冷。固相對於10公升液氮罐第一 次需定15公升液氮。液氮可有效儲存樣品半個月。
提取rna的植物組織，液氮可以儲存多久
2樓：匿名使用者
最好是採集完了之後用液氮速凍後，存放在-70的超低溫冰箱裡。-20度並不能存多久，尤其是如果你要用來做cdna文庫這類對rna質量要求很高的實驗的話是絕對不行的。
如何選擇正確的rna提取方法
3樓：匿名使用者
biodai離心法對於拭子的bai處理，向離心du
管中加入800μl生理鹽zhi水dao，將拭子版收集的樣本置於生理鹽水中，涮洗20秒，使細。
權胞完全脫落，貼離心管壁擠乾拭子上的液體，12,000 rpm 離心5 min，棄700 μl上清，剩餘100μl上清，充分振盪混勻15秒。
液氮冷凍**後需要注意什麼？
4樓：網友
一）病人於**中，會感到刺痛，**後數小時，可能有水泡形成，如果患部位於關節附近，則可能會有**腫脹的情形，而且會持續數天，不過這些都是**後正常的反應，不需過度的擔心，會自然痊癒。最好不要將水皰弄破，任其自然就可以了。
（二）如果水泡不小心弄破，有滲出液時，傷口早晚應用生理食鹽水或煮沸後冷開水，清洗傷口並塗抹消炎藥膏，再用砂布包紮即可。
（三）一些頑固的病灶，需多次療程，才能達到**的療效，病人必須與醫師配合，按時回診、**，以避免**。
cdna為什麼-20℃儲存,rna要在液氮罐中儲存，這兩個儲存的溫度為什麼不一樣
5樓：一滴雪花舞
因為rna在離體後非常不穩定，很容易被降解，故一般是在零下七八十℃下長期儲存，而逆轉成cdna後，它的穩定性比較高，所以零下二十度也就可以儲存一二十年的，如果更長期，那也可以儲存在液氮中的。
如何防止提取過程中rna的降解
6樓：魚骨頭
因為自然界bai（實驗du室）普遍存在。
zhirna酶，提取時需要注意幾dao點：
1、所用版試劑、耗材需用depc水浸泡然後高權壓滅菌2、實驗時戴口罩，主要是防止呼吸、說話時rna酶進入試劑中3、實驗台保持清潔、降低環境rna酶。
4、rna提取後，放入-80攝氏度儲存，防止降解。
7樓：人生如夕陽
我覺得rna在提取過程中並不是很容易降解，勻漿可以用勻漿器，機械打磨的效果可能要比手工去 勻漿要高效一點。
我用的也是tripure或trizol，所以並不太清楚應該怎麼配試劑，下面的方法可以一試。
total rna提取。
total rna extract
1. cell sample (50mg)+lysis (denaturation liquor) +巰基乙醇1.
6ul，充分混勻，此液體可放於-20℃儲存1-2 months。組織則先進行勻漿。所有操作均在4℃進行。
2. +平衡酚（飽和酚）500ul (ph ，充分mixture for 3min
3. 2m 醋酸鈉 50ul，混勻（
4. 氯仿/異戊醇 （49：1） 100ul，上下顛倒混勻。
5. 冰浴 15min
6. 4℃ 13000rpm for 10min
7. 吸上清；加氯仿/異戊醇 500ul，搖勻2min
8. 12000g (13000rpm) for 10min
9. 吸上清，加異丙醇 500ul，混勻，-20℃沉澱20min以上。
10. 12000g (13000rpm) for 10-15min
11. 棄上清，75%乙醇（4℃）500ul，洗沉澱。
12. 12000g (13000rpm) for 10min
13. 棄上清， 37℃烤箱5min，或室溫乾燥。
14. 取適量水溶rna（1*te）
15. –20℃或-70℃儲存。
reagents
1 變性液。
異硫氰酸胍
檸檬酸鈉 十二烷基肌氨酸鈉
+ h2o 至 50ml
2．2m 醋酸鈉。
naac +ddh2o, 以hac調ph至， 加水至50ml
3．氯仿/異戊醇 （49：1）
4． 75%乙醇。
from our lab
result:
260/280=左右。
關鍵點：吸取水相時寧少勿多。
本方法優點：簡便，不需kit，費時少，費用低，細胞組織均適合，不需超高速，對大多數實驗均適合。
缺點：不能一步分離出蛋白質和dna。不過我曾想同時抽提dna，但沒試過，但理論上是可行的。
8樓：匿名使用者
滅菌的一次性使用的塑料製品基本上無rna酶，可以不經預處理直接用於製備和貯存rna。實驗室用的普通玻璃器皿和塑料製品經常有rna酶法染，使用前必須於180 ℃乾烤8小時或更長時間（玻璃器皿）或用氯仿沖洗（塑料製品）。另一種方法是用0.
1 ％焦碳酸二乙酯（depc）的水溶液浸泡用於製備rna的燒杯，試管和其他用品。depc是rna酶的強烈抑制劑，但其作用並不是絕對的（fedorcsak和ehrenberg,1966）。灌滿depc的玻璃或塑料器皿在37℃放置2小時，然後用滅菌水淋洗數次， 並於100℃乾烤15分鐘（kumar和lindberg,1972)。
在15 lbf/in2(高壓蒸氯滅菌15分鐘。上述處理可以除去器甲上痕量的depc，以防depc通過羧甲基化作用對rna的嘌呤鹼基進行修飾。
羧甲基化的rna在無細胞體系中翻譯效率很低，然而，除非其中大部分嘌呤鹼基均被修飾，否則其形成dna：rna或rna：rna雜交體的能力並不明顯降低。
用於rna電泳的電泳槽應用去汙劑洗乾淨，再用水沖洗，用乙醇乾燥，然後灌滿3％的h2o2溶液，於室溫放置10分鐘，然後用 ％depc處理水徹底沖洗電泳槽。最好能留出一些玻璃器皿、塑料製品和電泳槽作上特殊標記，存放在指定地點，為rna實驗專用。
9樓：匿名使用者
降解方法可以用takara，兩步法先把rna轉為cdna，然後再pcr，這樣不需要每次提rna，也可以一步內法加入totalrna。處理細節容：提取的時候，用到的器具需要depc的水處理後高壓。
去除外源性的rna酶對實驗影響，用trizol的話，分層取小心吸取，寧少取。電泳時可以用無rna酶的水配製的tbs，然後150v，10min，若電泳時間長，產生的熱也容易使rna降解。同時電泳也可以說明蛋白質去除是否完全。
求提rna應注意的問題，詳細一些
10樓：色彩檔案
器皿要depc處理或者180度1小時；
水要depc處理37度過夜處理；
試劑要depc處理水配置；
槍頭、離心管最好一次性的專業rna專用的，沒有要depc處理過夜；
操作時口罩、手套都要，並且少講話；
組織用液氮研磨磨碎，在加試劑盒如trizol研磨徹底磨碎；
電泳時間要短，10多分鐘就好。還有麼？你出什麼問題？
11樓：匿名使用者
首先，所有用的器皿，以及試驗台等都要是無rna酶汙染的，戴口罩手套什麼的，這都是必備的。第二，考慮下所提取的材料是否新鮮，第三，考慮下試劑盒是否適合提你的材料，有些特殊的材料，需要用特殊的試劑盒。
植物總rna提取為什麼要加入液氮研磨
12樓：匿名使用者
1、使細胞變脆，便於破碎。
2、低溫保護rna，使不被降解。
rna的提取方法
13樓：逯暮森香梅
1．提bai
取稱取鮮酵母du
159或幹酵母粉。，倒入zhi
100ml三角瓶中，加。
daonacl，水25ml，攪拌均勻，置於專沸水浴屬中提取lh。
2．分離。將上述提取液用自來水冷卻後，裝入大離心管內，以4000r／min離心10min，使提取液與菌體殘渣等分離。
3．沉澱rna
將離心得到的上清液傾於50ml燒杯內，並置入放有冰塊的250ml燒杯中冷卻．待冷至10℃以下時，用6mol／l
hci小心地調節ph值至注意嚴格控制ph）。調好後繼續於冰水中靜置10min，使沉澱充分，顆粒變大。
4．洗滌和抽濾。
上述懸浮液以。
4000r／min離心。
10min，得到。
rna沉澱。將沉澱物放在。
10ml小燒杯內，用95％的乙醇。
5～10ml充分攪拌洗滌，然後在布氏漏斗上用射水幫浦抽氣過濾，再用。
95％乙醇5～10ml淋洗。
3次。5．乾燥。
從布氏漏斗上取下沉澱物，放在6cm表面皿上，鋪成薄層，置於80℃烘箱內乾燥。將乾燥後的rna製品稱重，存放於乾燥器內。
14樓：匿名使用者
核酸的提取bai
一般有離心du柱型，溶液型和磁珠法三種zhi，原理dao及步驟基本相版。
同，雖然各公司推出了多種權類似產品，讓人不知如何去選擇，但從原理和操作步驟看，基本就是離心柱型，溶液型或者磁珠法。一般來說，離心柱提取純度高一些，我們實驗室用的biodai離心法，處理量也能達到1000ul。
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