1樓：溫柔ˉp紎空
pi單染色法原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特徵性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特徵性。
pi單染色法的實驗原理：
2樓：小青年
1. 細胞核的改變：由於凋亡細胞核的改變，造成各種染色體螢光染料對凋亡細胞dna可染性發生改變。
研究表明，用各種染色體螢光染料對經固定的凋亡細胞進行染色，其dna可染性降低。許多學者把這種dna可染性的降低認為是凋亡細胞的標誌之一。
2. 光散射特性：凋亡細胞形態上的改變影響它們的光散射特性。
在流式細胞儀上，前散射光與細胞的大小有關，而側散射光反映的是光在細胞內的折射作用，與細胞內的顆粒多少有關。在細胞凋亡時，細胞固縮，體積變小，故前散射光降低，這一特性往往被認為是凋亡細胞的特點之一。此外細胞凋亡時由於染色體降解，核破裂形成，細胞內顆粒往往增多，故凋亡細胞側散射光常增加。
細胞壞死時，由於細胞腫脹，其前散射光增大；側散射光在細胞壞死時也增大，因此可根據前散射光和側散射光區別凋亡細胞和壞死細胞。但需要注意的是，根據前散射光和側散射光判斷凋亡細胞的可靠性受被檢測細胞形態上的均一性和核胞漿比率影響很大。因此在某些淋巴細胞凋亡中，用光散射特性檢測凋亡的可靠性較好，而在腫瘤細胞凋亡中，其可靠性就較差。
根據光散射特性檢測凋亡細胞最主要的優點是可以將光散射特性與細胞的表面免疫螢光分析結合起來，用以區別經這些特殊處理發生選擇性凋亡的淋巴細胞亞型。也可用於活細胞的分類。
pi單染色法的試劑與儀器
3樓：迷迭逆夏
pbs溶液；
pi染液：將pi溶於pbs（ph7.4）中，終濃度為100ug/ml。用棕色瓶4℃避光儲存。
70%乙醇
400目篩網
流式細胞儀
怎樣利用pi單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡
4樓：匿名使用者
pi 單染並不是很好的看凋亡的方法。一般可以作為早期的篩選實驗，因為特異性不好
方法和做細胞週期是一樣的，你可以查一下做細胞週期的實驗方法，我這裡就不貼了。
幾點注意：
一定要設定單細胞gate，以防多聚細胞核雜質的干擾rna酶不要忘記了
固定時間半小時足以，千萬不要在酒精中過夜，不然會產生大量碎片
怎樣利用pi單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡？
5樓：齊進訾昆琦
基本bai原理
流式細胞儀檢測細胞凋亡
du：pi單染色法其原
zhi理主dao
要是根據細胞凋亡時在細胞、亞版細胞和分子水權平上所發生的特徵性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特徵性，主要包括以下幾個方面：
1、細胞核的改變
由於凋亡細胞核的改變，造成各種染色體螢光染料對凋亡細胞dna可染性發生改變。研究表明，用各種染色體螢光染料對經固定的凋亡細胞進行染色，其dna可染性降低。許多學者把這種dna可染性的降低認為是凋亡細胞的標誌之一。
生物幫上面有詳細的介紹，shrna
設計原則
流式pi單染檢測細胞週期為什麼用乙醇固定細胞
請教流式細胞術pi染色進行細胞週期分析的原理
6樓：北京索萊寶科技****
實驗原理：流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中，在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱。
通過對流動液體中排列成單列的細胞進行逐個檢測，得到該細胞的光散射和螢光指標，分析出其體積、內部結構、dna、rna、蛋白質、抗原等物理及化學特徵。
細胞內的dna含量隨細胞週期程序發生週期性變化，如g0/g1期的dna含量為2c，而g2期的dna含量是4c。利用pi標記的方法，通過流式細胞儀對細胞內dna的相對含量進行測定，可分析細胞週期各時相的百分比。
流式細胞術pi染色求助
7樓：匿名使用者
不知道你具體問什麼，先參考一下我前面對pi的這個回答吧：
pi 是 propidium iodide的縮寫，該染料能和核酸鏈結合後，被激發發出螢光。
其實並不是檢測凋亡，而是檢測的細胞膜的完整性。完整的細胞膜對pi沒有通透性，pi不能進入細胞內和核酸結合，所以細胞不能被染色。只有細胞發生了凋亡，或者壞死，或者人為因素，比如胰酶消化，吹打，刮取等等操作，損傷了細胞膜。
這樣的細胞就會被染色了。
所以pi本身並不是乙個用來顯示凋亡的特異性的染料。假陽性很多。一般最多用來做初步篩選，如果要確認確實是凋亡的話，需要其他方法。
pi的目的就是判斷細胞膜的損傷，和凋亡並不是對應關係。
什麼是革蘭氏染色法？這種染色法在細菌的鑑定上有何重要意義
由子細菌細胞壁的結構和組成不同，用革蘭氏染色法可將細菌分離為革蘭氏陽性菌 g 和革蘭氏陰性菌 g 兩類。g 的細胞壁主要友肽聚醣形成的網狀結構組成，用乙醇脫色時細胞壁脫水，肽聚醣層的網狀結構孔徑縮小，透性降低，結晶紫一碘的複合物不易被洗脫而保留在細胞內，經脫色和復染後仍保留初染劑的藍紫色。由g 細胞...