用什麼方法探知細胞內蛋白質表達水平

時間 2021-09-12 03:09:29

1樓:北京索萊寶科技****

實時螢光定量pcr檢測mrna的表達,然後westernblot檢測蛋白表達量.

首先你確定拿到了這兩種細胞系,通過pcr反應證明乙個是野生型乙個是突變型,即snp。然後用試劑盒提取rna,設計引物,採用半定量或絕對定量的方法,測定mrna表達水平;然後另取細胞裂解,提取總蛋白,用特異性抗體檢測蛋白表達量。

2樓:匿名使用者

蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變,會影響其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如鐮狀細胞貧血,就是由於血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的谷氨酸變異成了纈氨酸,從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸,降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度,使它在紅細胞中隨血流至氧分壓低的外周毛細血管時,容易凝聚並沉澱析出,從而造成紅細胞破裂溶血和運氧功能的低下。另實驗證明,若切除了促腎上腺皮質激素或胰島素a鏈n端的部分氨基酸,它們的生物活性也會降低或喪失,可見關鍵部分氨基酸殘基對蛋白質和多肽功能的重要作用。

所謂「分子病」,首先是蛋白質一級結構的改變,從而引起其功能的異常或喪失所造成的疾病。可見蛋白質關鍵部位甚至僅乙個氨基酸殘基的異常,對蛋白質理化性質和生理功能均會有明顯的影響。分子病是基因突變引起的遺傳性疾病,當然首先就是dna分子結構的改變,是其分子編碼相應蛋白質基因結構的改變,這是 2023年美國科學家pauling在研究血紅蛋白時首先提出來的。

目前已知血紅蛋白分子異常有500多種,其中約一半在臨床上可造成分子病。分子病也包括整條多肽鏈在合成時的缺失,如血紅蛋白分子病中的地中海貧血,可缺失血紅蛋白α-亞基或β-亞基等。現在已知人類有幾千種先天遺傳性疾病,其中大多是由於相應蛋白質分子異常或缺失所致。

細胞中蛋白質表達量用什麼方法

3樓:匿名使用者

如做成提取液可用 mgprot/ml 毫克蛋白每毫公升

也可用毫克蛋白每10的6次方個 mgprot / 100萬個

檢測基因蛋白水平的表達有哪些方法

4樓:匿名使用者

怎樣用基因水平或蛋白水平檢測細胞膜上表達的物質

a、不同種類的蛋白質行使不同的功能,細胞中蛋白質的種類越多,通常細胞的功能越複雜,a錯誤.b、細胞膜上有運載物質的載體蛋白、細胞質中有起催化作用的酶、細胞核中的染色體上有與dna結合的有蛋白質,不同種類的蛋白質功能不同,是生命活動的主要承擔者,b正確.c、dna主要存在於細胞核中,rna主要存在於細胞質中,c錯誤.d、人細胞核及細胞質中的遺傳物質都是dna,只有少數病毒體內只含rna的遺傳物質才是rna,d錯誤.故選:b.

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