酶聯免疫吸附實驗測艾滋病毒要多長時間

時間 2021-09-05 23:31:31

1樓:

elisa方法敏感性高,但是存在一定機率的假陽性。所以如果elisa陽性,一般都是需要再做免疫印跡法的檢測來確診的。

2樓:匿名使用者

可靠,但確診還需要做免疫印跡的方法才能確診。

3樓:斬斷流水

酶聯法是主流的檢測方法,有效,可信,可靠

4樓:匿名使用者

人抗人類免疫缺陷病毒抗體(hiv)elisa kit 可靠

hiv的檢測步驟有哪些

5樓:mango菁菁

目前艾滋檢測方法很多,步驟也不同。可以到醫院或疾控免費檢測,也可在家自測唾液收集器天貓檢測專案的樣品種類

1. hiv 抗體檢測:全血、血清、血漿、口腔黏膜滲出液、尿液以及幹血斑樣品。

2. hiv 抗原檢測:全血、血清、血漿、病毒培養上清液。

3. t 淋巴細胞亞群測定:edta 或肝素抗凝全血。

4. hiv-1 病毒載量、基因型、耐藥檢測:血漿、濾紙幹血斑(dbs)。

5. hiv 核酸定性與定量、基因型檢測和 hiv-1 分離培養:淋巴細胞富集液、外周血單核淋巴細胞(pbmc)及全血。

當然,實驗室最常用的仍然是血液標本,其他只作為補充樣本。

hiv 抗體檢測

hiv 抗體檢測是艾滋病實驗室檢測的優先選擇專案,在國內絕大多數初篩實驗室應用最廣泛。

1. 初篩方法

(1)酶聯免疫吸附試驗(elisa)

elisa 法檢測 hiv 抗體是 hiv 初篩實驗室最常用最普遍的方法,目前檢測試劑已經發展到***,即同時檢測血液中 hiv-1p24 抗原和 hiv-1/2 抗體,秉承「寧可錯殺一千,不可漏網一個」的革命精神,其靈敏度遠高於特異性,直叫 hiv 抗體無處遁形。

(2)化學發光或免疫熒光試驗(cia/ifa)

這個試驗方法是近 10 年迅猛發展的一種新型檢測方法,其採用發光或熒光底物,既可檢測抗體,也可聯合檢測抗原抗體,用發光或熒光儀測定結果,其靈敏度較 elisa 有了進一步的提高,同時帶來的是檢測成本的增加和假陽性率的增高。

(3)快速檢測(rt)方法

此類方法操作簡便快速,適用於應急檢測、門診急診檢測,但靈敏度和特異性遠不如 elisa 和發光法,但是經濟實惠,也有一定的市場影響力。主要包括以下幾種方法:明膠顆粒凝集試驗(pa)、免疫滲濾試驗、免疫層析試驗。

2. 確認實驗

(1)免疫印跡試驗(wb)

wb 採用間接法檢測樣品中的抗 hiv-1/hiv-2 特異性抗體。採用聚丙烯醯胺凝膠電泳把分子量大小不等的 hiv-1 蛋白分離開來,經過一系列處理後,硝酸纖維素膜顯示與特異抗原的結合的抗體條帶,從而確診抗體的存在。

(2)條帶/線性免疫試驗(riba/lia)

實驗原理基本同 wb 法,不再贅述。

hiv-1 抗原檢測

1. 篩查實驗

(1)酶聯免疫吸附實驗(elisa 法):即***抗原抗體聯合檢測試劑盒。抗體包被固相反應孔(管)的底部,待測樣本中 p24 抗原與包被抗體形成抗原抗體複合物,再加入酶(hrp)標記的 hiv-1 抗體與抗原結合,加底物顯色,在酶標儀上讀取結果。

因同時檢測抗原抗體,靈敏度大大提高,有效縮短了 hiv 感染的檢測視窗期,但因試劑成本較高,在普通篩查實驗室推廣有一定難度。

(2)酶聯熒光分析法(elfa):待測樣品的 p24 抗原與包被在固相孔(管)內的 p24 抗體結合,並被生物素標記的 p24 抗體識別。臨床實驗室應用前景不明朗,需要熒光檢測裝置,成本較高。

(3)電化學發光法(eclia):待測樣品的 p24 抗原與包被抗體的磁性微粒和發光劑標記的抗體在反應管中溫育,形成磁性微珠包被抗體-抗原-發光劑標記抗體複合物。

(4)抗原抗體快速檢測法:同快速方法(rt)檢測抗體,不同之處是用 hiv 抗體包被載體,檢測靈敏度同樣較差。

2. 中和試驗

中和試驗主要是 p24 抗原檢測的補充試驗,還可做 hiv-1rna 的定性或定量檢測,以排除篩查試驗的假陽性。

(1)酶聯免疫吸附實驗(elisa 法):待檢樣品先與中和劑(p24 抗原的抗體)共同孵育,如果樣品中存在 p24 抗原,中和抗體將與之結合形成複合物,而不能與固相載體上的捕獲抗體結合。

(2)酶聯熒光分析法(elfa):原理和檢測步驟同上述酶聯免疫吸附實驗(elisa 法),中和率 ≥ 60 %,認為樣品中的 p24 抗原是真陽性。

(3)電化學發光法 (eclia):原理和檢測步驟同上述酶聯免疫吸附實驗(elisa 法),中和率大於 50%,認為樣品中的 p24 抗原是真陽性。

hiv 核酸檢測

目前國內 hiv 核酸檢測試劑主要為 taqman 實時熒光 pcr 檢測試劑,可檢測血漿、血清、組織器官或血液製品的 hiv-1rna 和 dna,dbs 可用於檢測 rna/dna。全球目前正式用於臨床診斷 hiv-1 急性期感染的核酸檢測試劑比較少,主要是美國 fda 批准的 gen-probe 公司生產的 aptima hiv-1 rna 核酸定性檢測試劑和歐盟批准的 abbott m2000 hiv-1 rna/dna 定性檢測試劑。

臨床診斷相關的檢測策略及結果報告

hiv 檢測陽性結果的檢測過程一般經歷兩個階段,初篩和複檢程式。以 hiv 抗體檢測為例,具體流程如下:

試劑 1 進行初篩,結果無反應,報告「hiv 抗體陰性」;結果有反應,不能出具陽性報告,必須進入複檢試驗。對初篩有反應的樣品,用原有試劑雙份或雙孔進行復檢試驗(或者兩種試劑複檢),如均無反應,報告「hiv 抗體陰性」;如均有反應或一個有反應一個無反應,進行補充試驗(抗體確證試驗和 hiv-1 核酸試驗),報告 hiv 感染待確定。

酶聯免疫吸附試驗的吸附試驗

陳剛 自從engvall和perlman 1971 首次報道建立酶聯免疫吸附試驗 enzyme linked immunosorbentassays,elisa 以來,由於elisa具有快速 敏感 簡便 易於標準化等優點,使其得到迅速的發展和廣泛應用。儘管早期的elisa由於特異性不夠高而妨礙了其在...