紫外 可見分光光度法,用吸收係數法定量,公式是什麼

時間 2021-08-30 09:23:50

1樓:蕢言程夢凡

一、原理可見光、紫外線照射某些物質,主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收,而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。

1朗伯—比耳定律a=lg—-=eclt式中a為吸收度;t為透光率;e為吸收係數,採用的表示方法是(e1%1cm),其物理意義為當溶液濃度為1%(g/ml),液層厚度為1cm時的吸收度數值;c為100ml溶液中所含被測物質的重量(按乾燥品或無水物計算),g;l為液層厚度,cm。二、使用範圍凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用於藥品的鑑別、純度檢查及含量測定。三、儀器可見-紫外分光光度計。

其應用波長範圍為200~400nm的紫外光區、400~850nm的可見光區。主要由輻射源(光源)、色散系統、檢測系統、吸收池、資料處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據相對測量的原理工作的,即先選定某一溶劑(或空氣、試樣)作為標準(空白或稱參比)溶液,並認為它的透光率為100%(或吸收度為0),而被測的試樣透光率(或吸收度)是相對於標準溶液而言,實際上就是由出射狹縫射出的單色光,分別通過被測試樣和標準溶液,這兩個光能量之比值,就是在一定波長下對於被測試樣的透光率(或吸收度)。

本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質。使用前應校正測定波長並按儀器說明書進行操作。四、儀器的校正1.

波長的準確度試驗以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm範圍內。可用儀器中氘燈的486.

02nm與656.10nm譜線進行校正。2.

吸收度的準確度試驗3.雜散光的試驗4.波長重現性試驗5.

解析度試驗

五、測定方法1.對照品比較法(1)按各品種項下的方法,分別配製供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%,所用溶劑也應完全一致,在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度後,按下式計算含量,即得。(2)計算式a樣×g對/稀釋倍數×100×1含量(%)=————————————--×100%a對×g樣/稀釋倍數×100×12.

吸收係數法(1)按各品種項下的方法配製供試品溶液,在規定的波長處測定其吸收度,再以該品種在規定條件下的吸收係數計算含量。用本法測定時,應注意儀器的校正和檢定。(2)計算式a樣含量(%)=——————————————-×100%g樣/稀釋倍數×(e1%1cm)對×100×13.

計算分光光度法採用計算分光光度法應慎重。本法有多種,使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上公升或下降的部位測定時,波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響,故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。

若測定時不用對照品,如維生素a測定法,則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。六、注意事項1.空白溶液與供試品溶液必須澄清,不得有渾濁。

如有渾濁,應預先過濾,並棄去初濾液。2.測定時,除另有規定外,應以配製供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照,採用1cm的石英吸收池。

3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度,以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確,除另有規定外,吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內;否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的準確度,並以吸收度最大的波長作為測定波長。4.

一般供試品溶液的吸收度讀數,以在0.3~0.7之間的誤差較小。

5.吸收池應選擇配對,否則要引入測定誤差。

2樓:匿名使用者

a=ecl c=a/el

a為吸收度;t為透光率;e為吸收係數,採用的表示方法是(e1%1cm),其物理意義為當溶液濃度為1%(g/ml),液層厚度為1cm時的吸收度數值;c為100ml溶液中所含被測物質的重量(按乾燥品或無水物計算),g;l為液層厚度,cm。

紫外-可見分光光度法是在190~800nm波長範圍內測定物質的吸光度,用於鑑別、雜質檢查和定量測定的方法。當光穿過被測物質溶液時,物質對光的吸收程度隨光的波長不同而變化。因此,通過測定物質在不同波長處的吸光度,並繪製其吸光度與波長的關係圖即得被測物質的吸收光譜。

從吸收光譜中,可以確定最大吸收波長λmax和最小吸收波長λmin。物質的吸收光譜具有與其結構相關的特徵性。因此,可以通過特定波長範圍內樣品的光譜與對照光譜或對照品光譜的比較,或通過確定最大吸收波長,或通過測量兩個特定波長處的吸收比值而鑑別物質。

用於定量時,在最大吸收波長處測量一定濃度樣品溶液的吸光度,並與一定濃度的對照溶液的吸光度進行比較或採用吸收係數法求算出樣品溶液的濃度。

原理可見光、紫外線照射某些物質,主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收,而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。

紫外吸收光譜分析法的定性和定量分析的依據是什麼

3樓:匿名使用者

分析的依據是:根據物質對不同波長的紫外線吸收程度不同而對物質組成進行分析的方法。此法所用儀器為紫外吸收分光光度計或紫外-可見吸收分光光度計。

光源發出的紫外光經光柵或稜鏡分光後,分別通過樣品溶液及參比溶液,再投射到光電倍增管上,經光電轉換並放大後,由繪製的紫外吸收光譜可對物質進行定性分析。

由於紫外線能量較高,故紫外吸收光譜法靈敏度較高;同時,本法對不飽和烯烴、芳烴、多環及雜環化合物具有較好的選擇性,故一般用於這些類別化合物的分析及相關汙染物的監測。

如,水和廢水統一檢測分析法中,紫外分光光度法測定礦物油、硝酸鹽氮;以可變波長紫外檢測器作為檢測器的高壓液相色譜法測多環芳烴等。

4樓:解莞繁凡白

定量的根據是朗伯比爾定律。

定性的依據是吸收曲線的特徵值以及整個吸收曲線的形狀。

紫外可見吸收光譜法是利用某些物質的分子吸收10~800nm光譜區的輻射來進行分析測定的方法,這種分子吸收光譜產生於價電子和分子軌道上的電子在電子能級間的躍遷,廣泛用於有機和無機物質的定性和定量測定。該方法具有靈敏度高、準確度好、選擇性優操作簡便、分析速度好等特點。

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